在藥物開發(fā)中，差示掃描星熱儀常用于藥物篩選和優(yōu)化過程，特別是在開發(fā)需要與特定蛋白質(zhì)結合的化合物時。這種方法能夠測量蛋白質(zhì)在受熱時的熱行為，特別是在其結構發(fā)生變化時釋放或吸收的熱量。DSC能夠提供有關蛋白質(zhì)折疊和穩(wěn)定性的重要信息，這對藥物設計、生物技術和疾病研究等領域都是非常有價值的。通過比較未結合和已結合藥物的蛋白質(zhì)的DSC曲線，可以評估藥物候選物如何影響蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性。

在生物制藥領域，DSC常被用作一種品控方法，從而能夠去確保膠原蛋白藥物在整個生產(chǎn)存儲過程中的一個穩(wěn)定性和完整性。DSC方法不僅可以提供蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性的信息，還可以幫助研究蛋白質(zhì)折疊動力和二級結構。這是通過分析DSC曲線上面不同轉(zhuǎn)變實現(xiàn)的，這些轉(zhuǎn)變可能可能對應于 蛋白質(zhì)不同結構或其他反應。

如何使用DSC差示掃描量熱儀測蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性？

1、測試設備：SC-DSC-D40差示掃描量熱儀

2、操作步驟：

2.1 取制樣品10-15mg 并放入坩堝稱重

2.2 按照儀器的操作手冊安裝調(diào)節(jié)氣體流量。

2.3 編寫升溫程序，以5'C/min 升溫在70-90°范圍內(nèi)進行升溫測試。

2.4 記錄實驗數(shù)據(jù)并分析結果。

通過實驗分析圖譜所示，可以直接看出蛋白質(zhì)的熔點(TM)46'℃及開始變性的一 個溫度點，即穩(wěn)定性被破壞。熱焓值50J/g 對于蛋白質(zhì)而言，這意味著用于使于蛋白質(zhì)發(fā)生折疊所花費的總熱量，代表一個吸熱過程。由于蛋白質(zhì)在 DSC 實驗中暴露于升高的溫度，因此蛋白質(zhì)開始發(fā)生熱變性，并伴隨著非共價鍵的斷裂。

通過此實驗也可判斷蛋白質(zhì)是否失活。在 DSC 技術中，^Hcat僅由 DSC 熱轉(zhuǎn)變峰曲線積分的面積來確定，而 “Hvn僅通過熱轉(zhuǎn)變峰曲線的形狀來確定。轉(zhuǎn)變峰形越 尖銳，“HVH越大，反之亦然。使用-Hca/4Hvn可以幫我們估測是否有很大部分蛋白質(zhì)是失活的。如果^Hcal顯著低于AHVH,可以表明很大部分蛋白質(zhì)已經(jīng)失活。